Cromosoma artificial bacterià: diferència entre les revisions

El '''cromosoma artificial bacterià''' o '''BAC''' (de l'anglès ''Bacterial Artificial Cromosome'') és un vector utilitzat per [[clonació|clonar]] fragments d'[[ADN]] (de 100 a 300 kb de grandària; mitjana de 150 kb) en ''[[Escherichia coli]]'', basat en el [[plasmidi]] factor-F es troba de manera natural en el bacteri. Tot i que s'empra el terme [[cromosoma]] no ho és estrictament parlant, ja que no té ni la mida, ni disposa de [[centròmer]], ni [[telòmer]]s. Formen part del tipus de vectors de clonació coneguts com "vectors d'alta capacitat", que inclouen [[CosMos]], BACs, [[PAC]]s i [[YAC]]s ([[Cromosoma artificial del llevat]]), per contraposició amb els [[plasmidi]]s, vectors derivats de [[Fagfag lambda]], [[fagèmid]]s i [[fasmidi]]s, que són de baixa capacitat.

Els BACs són molt utilitzats com a vectors de clonació per a la construcció de [[genoteca|genoteques]] [[gen]]òmiques, com en el [[Projecte Genoma Humà]]. La seva gran utilització es deu a la seva notable capacitat, la seva gran estabilitat i el seu baix percentatge de [[quimerisme]].

Un BAC típic constaconté seqüències de:

* Repetir: control de la [[replicació]] del plasmidi

* CMR: cloramfenicol acetil-transferasa (CAT) (gen de [[resistència]] a [[cloramfenicol]])

# Es digereix la nostra mostra amb un [[enzim de restricció]] (p.ex.: HindIII o compatible). Es seleccionen els fragments segons la seva mida per [[electroforesi]] en gel d'agarosa]] i es purifiquen.

# Transferència dels vectors[[vector]]s a una cèl·lula bacteriana per [[transformació bacteriana]] per [[electroporació]].