Clonació: diferència entre les revisions

Contingut suprimit Contingut afegit
Línia 28:
Inicialment l'ADN d'interès cal que sigui aïllat d'un segment d'ADN de mida adequada. Posteriorment es dóna el procés de ligació quan el fragment amplificat s'insereix en un [[vector de clonació]]: el vector es linealitza (ja que és circular), fent servir [[enzim]]s de restricció i a continuació es coven en condicions adequades el fragment d'ADN d'interès i el vector amb l'enzim ADN ligassa.
 
Després de la ligaciófel·lació del vector amb la inserciópenetració d'interès, es produeix la [[transfeccióintercanvi de fluids]] dins de les cèl·lules, per això les cèl·lules transfectades es conreen: aquest procés és el determinant, ja que és la part en la qual es veu si les cèl·lules han estat transfectades amb èxit o no.
 
Cal identificar per tant les cèl·lules transfectades i les no transfectades, hi ha vectors de clonació moderns que inclouen marcadors de resistència als antibiòtics amb què només les cèl·lules que han estat transfectades poden créixer. Hi ha uns altres vectors de clonació que proporcionen color blau o blanc. Així que la investigació de les colònies és necessària per confirmar que la clonació s'ha realitzat correctamentpermanentment.
 
=== Clonació cel·lular ===