Hibridació in situ per fluorescència: diferència entre les revisions

El '''FISH''' o l''''hibridació fluorescent in situ''' és una tècnica de [[tinció]] de [[cromosoma|cromosomes]] amb fluorocroms[[fluorocrom]]s en la que es provoca que els cromosomes específics brillinemetin fluorescència, “brillin”, sota el [[microscopi]]. Aquesta tècnica permet la ràpida determinació d'[[aneuploide|aneuploidies]], l'absència del cromosoma complet o la presència d'un cromosoma addicional, així com l'adjudicació d'un [[marcador genètic]] a un cromosoma ([[cartografia genètica]]).

El primer pas de la tècnica consisteix en la desnaturalització de l'ADN per separar la [[doble hèlix]]. A la mostra desnaturalitzada se l'afegeix llavors la sonda d'interès (seqüències cromosòmiques conegudes). Primer, les sondes hibriden a regions específiques. Després, es tenyeixen els nuclis amb un color de contrast inespecífic (generalment [[DAPI]]). Les sondes de l'ADN poden marcar-se amb molècules fluorescent (mètode directe) o no fluorescent que es detecten amb [[anticòs|anticossos]] fluorescents (mètode indirecte).

Hi ha sondes locus-específiques, [[centròmer|centromèriques]], [[telòmer|tel·lomèriques]] i de tot el cromosoma (pintat); amb els equips de microscopiamicroscòpia i de processament d'imatges adequats, es poden emprar diferents fluorocroms per identificar diferents sondes simultàniament i fins i tot obtenir el cariotip d'espectre multicolor (SKY) en la que casa cromosoma adquireix un color diferent que li proporciona l'ordinador després d'analitzar les 24 sondes de pintat cromosòmic, cadascuna específica per a un cromosoma i de colo diferent.

[[Categoria:Tècniques de laboratoriTincions]]