Biologia molecular: diferència entre les revisions

Contingut suprimit Contingut afegit
m desprès/després
m →‎Clonatge per a la expressió de proteïnes: Aegeixo enllaç cap a vector (biologia molecular)
Línia 39:
=== Clonatge per a la expressió de proteïnes ===
 
Una de les tècniques bàsiques de la biologia molecular en l'estudi de les funcions de les proteïnes és la clonació per a llur producció o expressió. En aquesta tècnica l'ADN que codifica la proteïna d'interès és [[clon]]at, mitjançant per exemple l'ús de la [[Reacció en cadena per la polimerasa|PCR]] o d'[[enzim de restricció|enzims de restricció]], en un [[vector (Biologiabiologia molecular)|vector]], generalment un [[plasmidi]], que en aquest cas s'anomena [[vector d'expressió]]. Aquest plasmidi pot tenir elements especials de control al [[promotor (Biologia molecular)|promotor]] que dirigeix la producció de la proteïna. També pot incloure marcadors de resistència a antibiòtics que permetin mantenir el plasmidi a les cèl·lules que produiran la proteïna.
 
Aquest plasmidi pot ser inserit en cèl·lules d'origen [[procariota|bacteri]]à o [[eucariota]]. La seva introducció en cèl·lules bacterianes s'anomena [[transformació]] i es pot aconseguir per diferents mètodes que poden ser químics (usant cations bivalents com el [[calci]] o [[rubidi]]) o d'una altra natura, com en el cas de l'[[electroporació]] o la [[conjugació]]. La introducció del plasmidi en una cèl·lula [[eucariota]] s'anomena [[transfecció]]. Com en el cas anterior, hi ha diverses tècniques de transfecció, incloent-hi la transfecció mitjançant fosfat de calci, la transfecció per [[liposomes]] i mitjançant agents comercials, com per exemple Fugene. L'ADN també es pot introduir en les cèl·lules a través de virus o [[Agrobacterium|bacteris patògens]] com a vehicles. En aquests casos la tècnica rep el nom de [[transducció]] viral or bacteriana i les cèl·lules obtingudes es diuen transduïdes.