Diferència entre revisions de la pàgina «ADN polimerasa I»

m (r2.7.2) (Robot modifica: zh:DNA聚合酶I)
(→)
Pol I té tres activitats enzimàtiques:
 
# Una activitat DNA-polimerasa en direcció 5 '-> 3' (endavant) , que requereix a l’extrem 3' un encebador i una cadena model.
# Una activitat exonucleasa en sentit 3 '-> 5' (al revés) que permet la correcció de l’ADN.
# Una activitat exonucleasa en direcció 5 '-> 3' (endavant) que permet la nick-translation durant la reparació de l’Adn.
 
En el procés de replicació, la DNA polimerasa I elimina l'encebador d'ARN (creat per la primasa) de la cadena retardada i omple amb nucleòtids necessaris els [[fragments d'Okazaki]] (vegeu [[Replicació de l'ADN]]) en sentit 5 '-> 3', corregint els errors. És un enzim que depèn de la cadena model - només afegeix nucleòtids amb les seves parelles de bases corresponent si hi ha una cadena d'ADN existent que actui com a model. La ligasa després uneix els diferents fragments junts en una cadena contínua d'ADN.
 
Tot i l’aviat caracterització de la Pol, aviat es va fer evident que la Pol no era l'enzim responsable de la majoria de síntesi d'ADN - en l’E. coli la replicació és d’aproximadament 1.000 nucleòtids / segon, mentre que la taxa de síntesi per la Pol I mitjana és de només 20 nucleòtids / segon . A més, la seva abundància cel•lular d'aproximadament 400 molècules per cèl∙lula no es correlaciona amb el fet que normalment hi ha només dos forquilles de replicació en E. coli. D'altra banda, no és suficient processiu per copiar un genoma complet, ja que cau després de la incorporació de només 25-50 nucleòtids. El seu paper en la replicació va quedar demostrat quan, el 1969, John Cairns aïlla una pol I viable mutada que no tenia l'activitat de la polimerasa<ref>[http://www.nature.com/doifinder/10.1038/2241164a0] Paula de Lucia; John Cairns (December 1969). "Isolation of an E. coli Strain with a Mutation affecting DNA Polymerase". Nature 224 (5225): 1164–66. </ref>
== Aplicacions a la investigació ==
 
La DNA polimerasa I obtingut de E. coli s'utilitza àmpliament per a la investigació de biologia molecular. No obstant, el 5 '-> 3' l’activitat exonucleasa activitat fa que sigui inadequat per a moltes aplicacions. Afortunadament, aquesta activitat enzimàtica indesitjable es pot extreure fàcilment de l'[[holoenzim]] per a deixar una molècula molt útil anomenat el fragment Klenow, àmpliament utilitzat en biologia molecular. L'exposició de l'ADN polimerasa I a la proteasa Subtilisin talla la molècula en un fragment més petit, que només conserva l’activitat de la ADN polimerasa.
 
== Notes i referències ==
 
{{Amaga ref}}
 
* [[Fragments d'Okazaki]]
* [[Replicació de l'ADN]]
 
 
{{ORDENA:ADN Polimerasa I}} <!--ORDENA generat per bot-->
114.912

modificacions