Tinció de Gram: diferència entre les revisions
Contingut suprimit Contingut afegit
m Revertides les edicions de: Valeroandreu (discussió) fins l'última edició de: Bestiasonica |
cristall violeta |
||
Línia 6:
Després de diluir el bacteri en una gota d'aigua i fixar-la amb calor lleu, s'han de seguir els següents passos seqüèncialment:
#Fixar les cèl·lules amb calor
#Afegir [[Blau Violeta]] (
#Esbandir amb aigua.
#Afegir [[
#Esbandir amb aigua.
#Afegir [[alcohol d'acetona]].
Línia 16:
=== Explicació ===
El primer pas en qualsevol tinció ha de ser sempre la fixació amb calor. Després, en agregar el cristall violeta
El Lugol està format per I<sub>2</sub> ([[iode]]) en equilibri amb KI ([[iodur de potassi]]), el qual està present per a solubilitzar el iode. El I<sub>2</sub> entra en les cèl·lules i forma un complex insoluble en solució aquosa amb el cristall violeta
La mescla d'alcohol-acetona que s'agrega, serveix per a realitzar la descoloració, ja que en la mateixa és soluble el complex I<sub>2</sub>/cristall violeta
Per a posar de manifest les cèl·lules gram negatives s'utilitza una coloració de contrast. Habitualment és un colorant de color roig, com la safranina o la [[fucsina bàsica]]. Després de la coloració de contrast les cèl·lules gram negatives es veuen roges, mentre que les gram positives romanen blaves.
Línia 26:
=== Observacions ===
*Sempre que es realitza el protocol, és fonamental realitzar el tractament amb cristall violeta
*El procés de descoloració no ha de ser extens, i ha de respectar-se el protocol quant al temps designat per als mateix. Així mateix, ha d'utilitzar-se poca aigua per a evitar la pèrdua de tinció dels Gram negatius.
*En treballar amb cultius de més de 24 hores, no es pot garantir la integritat de la paret cel·lular dels mateixos, i llavors el complex cristall violeta
== Utilitats ==
Línia 36:
A partir del tinció de Gram poden distingir-se diversos morfotipus distints:
*Els '''[[coc]]s''' són de forma esfèrica. Poden aparèixer aïllats després de la divisió cel·lular (
* Els '''[[bacil]]s''' posseeixen forma allargada. En general solen agrupar-se en forma de cadena (
* També poden distingir-se els '''[[espirals]]''', que es classifiquen en:▼
▲*També poden distingir-se els '''[[espirals]]''', que es classifiquen en:
** [[Espiril]]s si són de forma rígida o
** [[espiroqueta|Espiroquetes]] si són blanes i ondulades.
* Si al contrari, posseeixen forma de "'''coma'''", o corbats, llavors se'ls designa '''[[vibrió|vibrions]]'''.
== Fonament teòric==
Linha 55 ⟶ 54:
Per tant, ambdós tipus de bacteris es tinyen diferencialment a causa d'aquestes diferències constitutives de la seua paret. La clau és el peptidoglicà, ja que és el material que confereix la seua rigidesa a la paret cel·lular bacteriana, i els gram positius el posseeixen en molta major proporció que els Gram negatius.
La diferència que s'observa en la resistència a la descoloració, se deu al fet que la membrana externa dels Gram negatius és soluble en [[dissolvent|dissolvent orgànic]], com per exemple la mescla d'alcohol/acetona. La capa de peptidoglicà que posseeix és massa prima com per a poder retindre el complex de cristall violeta
{{ORDENA:Tincio De Gram}}
| |||