Hibridació in situ per fluorescència: diferència entre les revisions

Contingut suprimit Contingut afegit
Cap resum de modificació
Cap resum de modificació
Línia 1:
[[Fitxer:Chr2 orang human.jpg|333px|thumb|Dues imatges de FISH [[metafase|metafàsic]] en humans. En groc, el cromosoma 2.]]
{{Polisèmia|hibridació}}
El '''FISH''' o l''''hibridació fluorescent in situ per fluorescència''' <ref>{{TERMCAT|hibridació in situ per fluorescència }}</ref>és una tècnica de [[tinció]] de [[cromosoma|cromosomes]] amb [[fluorocrom]]s en la que es provoca que els cromosomes específics emetin fluorescència, “brillin”, sota el [[microscopi]]. Aquesta tècnica permet la ràpida determinació d'[[aneuploide|aneuploidiesaneuploïdies]], l'absència del cromosoma complet o la presència d'un cromosoma addicional, així com l'adjudicació d'un [[marcador genètic]] a un cromosoma ([[cartografia genètica]]).
[[Fitxer:Chr2 orang human.jpg|thumb|FISH metafàsic en humans. En groc, el cromosoma 2.]]
El '''FISH''' o l''''hibridació fluorescent in situ''' és una tècnica de [[tinció]] de [[cromosoma|cromosomes]] amb [[fluorocrom]]s en la que es provoca que els cromosomes específics emetin fluorescència, “brillin”, sota el [[microscopi]]. Aquesta tècnica permet la ràpida determinació d'[[aneuploide|aneuploidies]], l'absència del cromosoma complet o la presència d'un cromosoma addicional, així com l'adjudicació d'un [[marcador genètic]] a un cromosoma ([[cartografia genètica]]).
 
Els cromosomes que són usualment utilitzats amb la tècnica del FISH són els 13, 18, 21, X i Y; no obstant, com són possibles tincions addicionals dels cromosomes, altres cromosomes poden ser visualitzats amb aquesta tècnica. Amb el FISH només fa falta tenyir segments d'un de les dos cadenes de l'ADN.
 
El primer pas de la tècnica consisteix en la desnaturalització de l'ADN per separar la [[doble hèlix]]. A la mostra desnaturalitzada se l'afegeix llavors la sonda d'interès (seqüències cromosòmiques conegudes). Primer, les sondes hibriden a regions específiques. Després, es tenyeixen els nuclis amb un color de contrast inespecíficno específic (generalment [[DAPI]]). Les sondes de l'ADN poden marcar-se amb molècules fluorescent (mètode directe) o no fluorescent que es detecten amb [[anticòs|anticossos]] fluorescents (mètode indirecte).
 
Hi ha sondes [[locus]]-específiques, [[centròmer|centromèriques]], [[telòmer|tel·lomèriques]] i de tot el cromosoma (pintat); amb els equips de microscòpia i de processament d'imatges adequats, es poden emprar diferents fluorocroms per identificar diferents sondes simultàniament i fins i tot obtenir el cariotip d'espectre multicolor (SKY) en la que casa cromosoma adquireix un color diferent que li proporciona l'ordinador després d'analitzar les 24 sondes de pintat cromosòmic, cadascuna específica per a un cromosoma i de colo diferent.
 
== Notes ==
<references />
 
[[Categoria:Tincions]]